高 阳，张国慧，周应卿，刘世琴，周鑫彤，赵博絮，张丹丹，李常红
角鲨烯对1～21日龄白羽肉鸡生长性能、抗氧化能力和免疫功能的影响
高 阳，张国慧，周应卿，刘世琴，周鑫彤，赵博絮，张丹丹*，李常红*
(白城师范学院生命科学学院，白城 137000)
为了研究SQ对1～21日龄白羽肉鸡生长性能、抗氧化能力和免疫功能的影响，选取体重为（38.38±0.25） g的 1日龄雄性AA+白羽肉鸡360只，将雏鸡随机分为3组，每组6个重复，每个重复20只，分别饲喂基础日粮，基础日粮+175 mg·kg-1角鲨烯（squalene，SQ）和基础日粮+350 mg·kg-1SQ，试验期为21 d。结果表明：（1）饲粮中添加175和350 mg·kg-1SQ均能显著提高肉鸡平均日增重，并显著降低料重比（＜0.05），同时提高肉鸡血清中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、过氧化氢酶（catalase，CAT）活性及总抗氧化力（total antioxidant capacity，T-AOC）（＜0.05），显著降低血清丙二醛（malonyldialdehyde，MDA）含量（＜0.05），且350 mg·kg-1SQ 添加量在改善肉鸡血清过氧化氢酶活性和总抗氧化力方面，效果显著优于175 mg·kg-1（＜0.05）。（2）饲粮中添加175和350 mg·kg-1SQ均能显著提高肉鸡血清中高密度脂蛋白、补体C3和C4水平（＜0.05），显著降低血清中低密度脂蛋白水平（＜0.05），且350 mg·kg-1SQ 添加量在降低血清低密度脂蛋白和提高补体C3和C4水平方面效果显著优于175 mg·kg-1（＜0.05）。（3）饲粮中添加175和350 mg·kg-1SQ均能显著提高肉鸡免疫器官指数（＜0.05）。综上所述，饲粮中添加 SQ能有效改善1～21日龄白羽肉鸡生长性能、抗氧化能力和免疫功能，其中350 mg·kg-1SQ在改善肉鸡血清过氧化氢酶、总抗氧化力、补体C3和C4方面更具优势。
角鲨烯；
肉鸡；
生长性能；
抗氧化能力；
免疫功能
角鲨烯（squalene，SQ）化学名称为2,6,10,15,19, 23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯，化学式C30H50，由日本学者首次从鲨鱼肝脏中发现[1]。自然界中，SQ及其衍生物广泛存在于植物籽实、动物肝脏、脂肪和皮肤中，鲨鱼肝脏、橄榄油和苋属植物籽实是获取天然SQ的主要来源。在动物体内，SQ在类固醇合成中扮演重要角色，在β-胡萝卜、辅酶Q10、维生素D、维生素E和维生素K1的合成途径中发挥重要作用，进而发挥其抗炎、抗氧化、促进肠道发育和保护心血管等功能[2]。随着SQ研究的深入，其安全性和饲用可行性被证实[3-4]。Zhang 等[5]研究表明，角鲨烯对种公猪精液品质具有较好的改善作用。Chen等[6]研究表明，饲料中添加1 000 mg·kg-1SQ能改善ROSS肉鸡的抗氧化力和肉品质。高阳等[7]研究发现，饲粮中添加250 mg·kg-1SQ 可改善仔猪生长性能，降低腹泻发生，对缓解仔猪早期断奶应激具有显著作用。目前，SQ作为畜禽饲料添加的报道较少。众所周知，1～21日龄是肉鸡生长的重要阶段，雏鸡将陆续面临环境适应和运输应激等问题。因此，平稳、健康的度过1～21日龄，能够为肉鸡的快速生长期夯实基础，提高肉鸡的生长性能。因此，本试验将SQ按照不同剂量添加到1～21日龄肉鸡饲粮中，探究其对白羽肉鸡生长性能、抗氧化能力和免疫功能的影响，为SQ在肉鸡生产中的应用积累经验。
1.1 试验动物及场地
1日龄雄性白羽肉鸡由吉林省长岭县利丰养殖场提供，共计360只，体重为（38.38±0.25） g，白羽肉鸡随机分为3组。试验时间为2021年7月—8月。养殖地点位于松原市长岭县。
1.2 试验设计
将雏鸡随机分为3组，每组6个重复，每个重复20只。分别饲喂基础日粮（对照组CK），基础日粮+175 mg·kg-1角鲨烯（squalene，SQ）和基础日粮+350 mg·kg-1SQ，试验期为21 d。试验肉鸡均采用笼养，自由采食与饮水，定时通风并打扫鸡舍，按照场区要求执行免疫程序。基础日粮营养参考NRC 2012和《动物营养参数和饲养标准》[8]设计，基础日粮和营养水平见表1。SQ购自山东腾望化工有限公司，纯度为99%，配制试验组日粮，先将SQ均匀混合入豆油，再添加到饲料中。
1.3 样品采集
试验结束前12 h禁食，次日收集肉鸡体重数据。采用翅下静脉采血，每只鸡采血8 mL，于3 500 r·min-1、4 ℃条件下离心15 min分离血清，血清样本分装于冻存管中，干冰预冷后转至–80 ℃冻存。
表1 基础日粮组成和营养水平(风干基础)
注：1）预混料为每千克日粮提供9500 IU VA、2750 IU、19.5 IU VE、0.45 mg VK3、2 mg VB1、8 mg VB2、3.5 mg VB6、0.01 mg VB12、35 mg 烟酸、10 mg 泛酸钙、0.55 mg 叶酸、0.32 mg 生物素、1 300 mg 氯化胆碱、8 mg 铜、100 mg 铁、120 mg 锰、100 mg 锌、0.7 mg 碘、0.3 mg 硒；
2）代谢能为计算值。
1.4 检测指标和方法
平均日增重（average daily gain，ADG）、平均日采食量（average daily feed intake，ADFI）和F/G的测定Chen等[6]的方法进行。在试验第21 天，在每个重复中选择2只精神状态良好且健康的肉鸡，空腹称重后剥离脾脏、法氏囊和胸腺，用电子天平称重，计算免疫器官指数。
抗氧化能力相关指标检测：SOD、T-AOC、GSH-Px、CAT和MDA使用南京建成生物工程研究所试剂盒，操作步骤按说明书进行。血液常规指标由金域医学检测完成。补体C3和C4含量采用免疫比浊法测定。
1.5 数据处理
使用SPSS 22.0软件中的One-Way ANOVA进行数据分析，采用Duncun’s多重比较进行差异显著性检验，以＜0.05作为差异显著性判断标准，试验数据以平均数±标准差表示。
2.1 SQ对1～21日龄肉鸡生长性能的影响
由表2可知：与CK组相比，饲粮中添加175和350 mg·kg-1SQ均能显著提高21日龄白羽肉鸡的ADG，并显著降低F/G（＜0.05），但对比175和350 mg·kg-1SQ添加水平，肉鸡生长性能差异不显著（＞0.05）。
2.2 SQ对1～21日龄肉鸡抗氧化能力的影响
由表3可知：与CK组相比，饲粮中添加175和350 mg·kg-1SQ，21日龄肉鸡血清中T-AOC、SOD活性、GSH-Px活性和CAT活性显著升高，同时MDA含量显著降低（＜0.05）。比较两试验组肉鸡血清抗氧化指标可知：与175 mg·kg-1SQ添加水平相比，饲粮中添加350 mg·kg-1SQ，21日龄肉鸡血清中GSH-Px活性和T-AOC水平显著提升（＜0.05）。
表2 SQ对1～21日龄肉鸡生长性能的影响
注：同列数据肩标不同表示差异显著（＜0.05），同列数据肩标相同或无肩标表示差异不显著（＞0.05）。下同。
2.3 SQ对1～21日龄肉鸡血清生化指标的影响
由表4可知：与CK组相比，饲粮中添加175和350 mg·kg-1SQ ，21日龄肉鸡血清高密度脂蛋白水平显著升高（＜0.05），但两试验组间差异不显著（0.05）。与CK组相比，饲粮中添加175和350 mg·kg-1SQ，21日龄肉鸡血清低密度脂蛋白显著升高（＜0.05），且A组显著高于B组（＜0.05）。
表3 SQ对1～21日龄肉鸡抗氧化能力的影响
表4 SQ对1～21日龄肉鸡血清生化指标的影响
表5 SQ对1～21日龄肉鸡免疫功能的影响
表6 SQ对1～21日龄肉鸡免疫器官指数的影响
2.4 SQ对1～21日龄肉鸡免疫功能的影响
由表5可知：与CK组相比，饲粮中添加175和350 mg·kg-1SQ，21日龄肉鸡血清IgG和IgM水平略有升高，但差异不显著（0.05），肉鸡血清C3和C4水平均显著升高（＜0.05），且饲粮中添加350 mg·kg-1SQ肉鸡血清补体C3和C4水平均显著高于175 mg·kg-1的添加水平（＜0.05）。
2.5 SQ对1～21日龄肉鸡免疫器官指数的影响
由表6可知：饲粮中添加SQ能显著提高21日龄肉鸡免疫器官指数（＜0.05）。与CK组相比，饲粮中添加175 mg·kg-1和350 mg·kg-1SQ ，21日龄肉鸡脾脏指数、法氏囊指数和胸腺指数均显著提升（＜0.05），但两试验组间差异不显著（0.05）。
Chen等[6]研究表明，在ROSS肉鸡饲粮中添加 1 000和2 000 mg·kg-1SQ，对21日龄肉鸡平均日增重和料肉比无显著影响，但可显著提高22～42日龄肉鸡的平均日增重并降低料重比。本研究中，饲粮添加175和350 mg·kg-1SQ，显著提高肉鸡的平均日增重并降低料重比。其原因可能是：一方面，不同品种肉鸡的生长高峰期存在差异；
另一方面，本研究全程在养殖场进行，有效缓解运输应激及其他环境因素对试验结果的影响。由此可知，SQ能在改善肉鸡生长性能方面发挥重要作用。但SQ在肉鸡饲粮中的添加剂量及其改善肉鸡生长性能的机制仍需进一步探索。
众所周知，机体的抗氧化能力与畜禽健康密切相关。抗氧化能力越强，畜禽抗逆、抗炎与抗病能力就越强[9-10]。SQ的抗氧化能力主要表现为两方面：一方面是清除单态氧清除能力；
另一方面能有效阻止自由基和毒物在细胞膜富集。得益于全反式6双键结构，SQ拥有良好的流动性，使其能够在生物膜表面均匀分布，进而发挥其抗氧化功能。研究表明，SQ能有效缓解diquat诱导的肉鸡肝脏氧化损伤，并提高肉鸡血清中SOD、GSH-Px和CAT活性，同时降低血清中的MDA水平[11]。研究表明，断奶仔猪饲粮中添加250 mg·kg-1SQ能有效改善断奶仔猪空肠形态、提高空肠组织抗氧化力[12]。本研究中，21日龄肉鸡血清中抗氧化酶活性增强，MDA含量下降，与前人研究结果相符。由此可知，SQ在改善肉鸡抗氧化能力方面具有积极作用。
研究表明，SQ在改善血清脂蛋白组成方面扮演重要角色，SQ不仅能提高血液中的HDL水平，降低LDL水平，还能有效抑制LDL与ROS发生脂质过氧化反应[13]。血清LDL水平的降低，有助于机体抗氧化系统的功能。SQ能与半胱氨酸巯基发生反应，抑制Nrf2泛素化，通过调控Keap1-Nrf2-ARE信号通路来改善动物的血液生化指标[14-15]。本研究中，SQ能够显著提升肉鸡血清中的HDL水平并降低LDL水平，提供肉鸡血清补体C3、C4水平。补体系统是先天免疫系统的组成部分，在调控炎症和免疫应答中发挥重要作用，补体系统激活后，可通过调控活化因子（Nf-kB）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和PI3K/AKT信号通路活性，进而提高动物先天免疫能力和抗炎能力[16-17]。本研究中，饲粮中添加SQ，21日龄肉鸡脾脏指数、法氏囊指数和胸腺指数均显著升高。在肉鸡的免疫系统中，脾脏、法氏囊和胸腺是重要的体液免疫器官，免疫器官指数的升高在一定程度上代表机体免疫功能发育成熟和免疫功能增强[18]。这表明，SQ能够通过提高补体水平和免疫器官指数来改善肉鸡的免疫功能，但SQ的具体作用机制仍需要较多研究。
饲粮中添加175和350 mg·kg-1SQ可有效改善1～21日龄白羽肉鸡生长性能、抗氧化能力和免疫功能，在本试验条件下，其中350 mg·kg-1SQ在改善肉鸡血清CAT、T-AOC、补体C3和C4方面更具优势，因此效果更佳。
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Effects of squalene on growth performance, antioxidant capacity and immunity function of broilers at age of 1-21 days
GAO Yang, ZHANG Guohui, ZHOU Yingqing, LIU Shiqin, ZHOU Xintong,ZHAO Boxu, ZHANG Dandan, LI Changhong
(College of Life Science, Baicheng Normal University, Baicheng 137000)
To investigate the effects of dietary supplementation SQ (squalene) on the growth performance, antioxidant capacity and immunity function of broilers at age of 1-21 days, 360 one-day-old male AA+boilers with body weight (38.38±0.25) g were randomly divided into 3 groups by single-factor experiment, with 6 replicates per group and 20 boilers per replicate. Broilers in CK group were fed with the basal diet, and experimental treatment groups were fed with basal diet with 175 and 350 mg·kg-1SQ, respectively. The experiment lasted for 21 days. The results indicated that: (1) Dietary supplementation of 175 and 350 mg·kg-1SQ significantly increased the average ADG (average daily gain) and significantly reduced the F/G (< 0.05). Dietary supplementation of 175 and 350 mg·kg-1SQ significantly increased serum SOD, GSH-Px, CAT and T-AOC activities in broilers (< 0.05), significantly reduced serum MDA content (0.05), and compared with 175 mg·kg-1, dietary supplementation of 350 mg·kg-1SQ significantly increased serum CAT and T-AOC activities in broilers. (2) Dietary supplementation of 175 and 350 mg·kg-1SQ significantly increased the serum HDL level, complement C3 and C4 levels in broilers(< 0.05), and significantly reduced the serum LDL level in broilers(0.05). Compared with 175 mg·kg-1, dietary supplementation of 350 mg·kg-1SQ significantly increased serum complement C3 and C4 levels, and serum LDL was significantly reduced (0.05). (3) Dietary supplementation of 175 and 350 mg·kg-1SQ significantly improved the immune organ index of broilers (0.05). In conclusion, dietary SQ effectively improved the growth performance, antioxidant capacity and immune function of 1-21 days old broilers, and 350 mg·kg-1SQ showed better function in improving serum CAT, T-AOC, complement C3 and C4 in broilers.
squalene; boiler; growth performance; antioxidant capacity; immunity function
S831.92
A
1672-352X (2022)06-0935-04
10.13610/j.cnki.1672-352x.20230106.007
2023-01-10 16:01:13
[URL] https://kns.cnki.net/kcms/detail//34.1162.S.20230109.1150.004.html
2022-08-28
吉林省科技厅项目（JJKH20190017KJ），白城师范学院博士科研启动资金（012006），吉林省大学生生命科学竞赛项目（105006）和吉林省大学生创新基金（X20220145）共同资助。
高 阳，博士，讲师。E-mail：179692058@qq.com 张国慧，本科生。E-mail：2810589413@qq.com
李常红，博士，副教授。E-mail：178163246@qq.com 张丹丹，副教授。E-mail：45160440@qq.com
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